等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点时应注意哪些

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/30 13:27:41
等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点时应注意哪些

等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点时应注意哪些
等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点时应注意哪些

等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点时应注意哪些
1.上样前冲去上样空底部未聚合的丙稀酰胺,否则电泳过程中会发生聚合;
2.现在有商品化的等电聚焦凝胶,但只限于水平平板电泳系统(如Pharmmacia-LKB,Hoefer).
3.加入过硫酸胺和TEMED,轻轻混匀(开始聚合,操作要迅速);
4.将上述混匀溶液倒如灌胶器(尽量避免气泡产生);
5.插入梳子,将梳子侵入胶内(不要产生气泡);
6.聚合约1小时;
7.聚合完成,小心拔去梳子;
8.将凝胶同冷却装置连接后插入电泳池,蛋白样品上样前最好用阳极电极液注入上槽中确定是否有渗漏.

控制以下几项:槽液的PH、电导率、固体份、颜基比、温度,电泳时电压

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