作业帮什么叫巢式PCR
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/29 19:28:25
什么叫巢式PCR
什么叫巢式PCR
什么叫巢式PCR
巢式PCR是一种变异的聚合酶链反应(PCR),使用两对（而非一对）PCR引物扩增完整的片段.第一对PCR引物扩增片段和普通PCR相似.第二对引物称为巢式引物（因为他们在第一次PCR扩增片段的内部）结合在第一次PCR产物内部,使得第二次PCR扩增片段短于第一次扩增.巢式PCR的好处在于,如果第一次扩增产生了错误片断,则第二次能在错误片段上进行引物配对并扩增的概率极低.因此,巢式PCR的扩增非常特异.
形象点儿说就像鸟巢，两对儿引物，一对扩长片段，一对儿设计在长片段内，这样做的好处是，提高扩增效率和特异性
巢式PCR（nest PCR），使用两对引物对目的基因进行扩增的一种PCR技术。首先在该基因起始密码子上游数百bp和终止密码子下游数百bp位置设置一对引物，这对引物由于可操控性大，可以将Tm值，引物结构等设置到最佳。或者可以通过软件自动分析，由机器给出引物序列。然后再在目的基因的准确位置设计第二对引物。
在进行PCR时，先用第一对引物进行扩增，扩增后跑胶检测，如果此时跑胶已经可以检测出较好...
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巢式PCR（nest PCR），使用两对引物对目的基因进行扩增的一种PCR技术。首先在该基因起始密码子上游数百bp和终止密码子下游数百bp位置设置一对引物，这对引物由于可操控性大，可以将Tm值，引物结构等设置到最佳。或者可以通过软件自动分析，由机器给出引物序列。然后再在目的基因的准确位置设计第二对引物。
在进行PCR时，先用第一对引物进行扩增，扩增后跑胶检测，如果此时跑胶已经可以检测出较好的条带，可以进行回收纯化，再将回收产物作为模板，用第二对引物进行第二轮扩增。如果第一轮产物跑胶时看不清楚条带，则可以将产物适当稀释，以此作为第二轮的模板进行扩增，一般在第一轮以低拷贝量存在的DNA通过第二轮的扩增都可以成功获得的。祝你成功。
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