PCR的产物跑琼脂糖凝胶电泳时,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从投拖到尾,而maker却是好的,说明不是电泳的问题,我把所有的酶,buffer,Mg+都换了一遍了还是找不到原因,结果照旧,重新合成了

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/07 03:22:59
PCR的产物跑琼脂糖凝胶电泳时,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从投拖到尾,而maker却是好的,说明不是电泳的问题,我把所有的酶,buffer,Mg+都换了一遍了还是找不到原因,结果照旧,重新合成了

PCR的产物跑琼脂糖凝胶电泳时,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从投拖到尾,而maker却是好的,说明不是电泳的问题,我把所有的酶,buffer,Mg+都换了一遍了还是找不到原因,结果照旧,重新合成了
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“从头拖到尾,另外一对引物就能做出来”
说明不是引物之间形成二聚体,而是第一对引物的设计有问题(特异性很差).如果一定要扩增那个区,建议引物的位置向两边放一放.如果你没有好的设计软件,建议到Primer3去试试(目前最好的免费引物设计).
如果还是不行,把序列发给我,我帮你设计(我有专业软件,ABI primer express 3 和 Invitrogen Vector NTI 10)

老兄你说的啥子嘛?根本看不懂 估计看不懂的大多 从此飘过留根毫毛

看不懂废话毛
说明你的引物不是一般的差。第一步是提高退火温度试试,还是不行就只能按照一楼说的重新设计。

可能就是引物特异性的问题,到网上再重新设计一个吧

引物设计问题,引物特意性差,3‘端gc比太高,或者有引物落入了串联重复序列中。建议做一下primer-blast看一下是什么问题,然后重新设计

请问你的PCR问题后来怎么解决的PCR的产物跑琼脂糖凝胶电泳时,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从头拖到尾,而maker却是好的,说明不是电泳的问题,我把所有的酶,buffer,Mg+都换了一 PCR结果呈弥散状是什么原因造成的我上个星期跑完PCR的产物跑琼脂糖凝胶电泳时,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从投拖到尾,而maker却是好的,说明不是电泳的问题,我把所有的酶,buffer,Mg+都 pcr产物琼脂糖凝胶电泳结果示什么都没有了,连溴酚蓝也没了 PCR的产物跑琼脂糖凝胶电泳时,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从投拖到尾,而maker却是好的,说明不是电泳的问题,我把所有的酶,buffer,Mg+都换了一遍了还是找不到原因,结果照旧,重新合成了 琼脂糖凝胶电泳用母液没有条带,而PCR扩增产物有条带,难道是母液的DNA浓度太低,电泳跑不出来? PCR扩增实验之后,产物用琼脂糖凝胶电泳,为什么看不到光带?添加试剂没有问题 2%琼脂糖凝胶电泳检测/分离DNA时凝胶的厚度DNA上样量50微升,凝胶的厚度应为多少?样品为PCR扩增产物,目的是要回收,做二次PCR 琼脂糖凝胶电泳问题请问做ISSR-PCR琼脂糖凝胶电泳一般使用多大浓度的胶. 聚丙烯酰胺凝胶电泳跑的水稻PCR产物,为啥如此拖带 如何确定PCR扩增产物分子量做PCR实验,产物琼脂糖凝胶电泳成像后得一条带,要求与mark对比确定扩增产物分子量. 在PCR扩增产物的琼脂糖凝胶电泳实验中,如何知道所观察的样品在电泳过程中的大概位置 为什么我DNA跑琼脂糖凝胶电泳时跑不出孔我们用PCR扩增出来的DNA分子,在跑琼脂糖凝胶电泳回收时居然跑不出孔 但是有条带,不知道是什么原因,另外说明一下,不是琼脂糖凝胶电泳的问题,因为 做PCR以后,跑电泳.结果一条带都没有,为什么我们做的是RT—PCR,用的是琼脂糖凝胶电泳 链球菌DNA做PCR,然后跑琼脂糖凝胶电泳电泳,结果出现了亮团,像太阳,请问是什么原因?链球菌DNA做PCR,然后跑琼脂糖凝胶电泳,结果每个条带上都出现了亮团,像太阳,请问是什么原因?但MARKER跑的很 做RT-PCR扩增后跑琼脂糖凝胶电泳有什么作用? PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳是一回事吗 如果PCR扩增实验中PCR产物在琼脂糖凝胶电泳试验中有条带,但是很浅,应该调整那些条件. 琼脂糖凝胶电泳实验失败原因?实验首先是用PCR扩增DNA片段,然后用琼脂糖凝胶电泳分析PCR产物的量,结果失败了,EB染色后凝胶上没有出现亮带.请教各位牛人这些步骤里面可能出现问题的在哪里