RT-PCR中合成第一链cDNA为什么可以进行PCR,难道不需要合成第二链吗

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/02 22:38:38
RT-PCR中合成第一链cDNA为什么可以进行PCR,难道不需要合成第二链吗

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RT-PCR中合成第一链cDNA为什么可以进行PCR,难道不需要合成第二链吗

RT-PCR中合成第一链cDNA为什么可以进行PCR,难道不需要合成第二链吗
因为做PCR只要一条模版就够了
第一链被逆转录完成之后,通过其中一种引物可以结合聚合出互补链,接下来的过程就是普通的PCR的过程了
之所以在RT的过程中只合成第一链,因为RT过程是需要逆转录酶,工作温度37℃,同时使用的是随机引物或者是oligo-dT;而PCR过程使用高温DNA聚合酶,工作温度72℃,同时使用的是特异的扩增引物.两个体系没有办法同时进行,就分开来做,那逆转录自然就只转录第一链了

RT-PCR中合成第一链cDNA为什么可以进行PCR,难道不需要合成第二链吗 反转录获得cDNA后,为什么还要做RT-PCR? 博凌科为Thermo RT Kit cDNA第一链合成试剂盒适用范围? 博凌科为Super RT Kit cDNA第一链合成试剂盒产品特点及适用范围? 博凌科为Supermo RT Kit cDNA第一链合成试剂盒产品特点? 博陵科为 Quant cDNA第一链合成试剂盒 怎么样? 哪里有合成cDNA第二链的试剂盒现已用宝生物公司的TaKaRa RNA PCR Kit (AMV) Ver.3.0 试剂盒将总RNA反转录,合成了CDNA的第一链,哪个试剂公司有合成CDNA第二链的试剂盒,或者直接用总RNA(不需分离m 纯化的双链cDNA要比单链的cDNA更容易做RT-PCR吧?如题,因为要P一段大约5-6kb的cdna片段,我在想合成cDNA的第二条链,然后纯化,这样应该更好P一些吧?求问大虾? 反转录cDNA第一链,进行PCR扩增,只有引物二聚体,这是为什么呢?Oligo(dT)反转录,目的片段2700bp,引物二聚体小于100bp 随机引物 之RT-PCR急!RT-PCR中,可以用随机引物反转录,想知道其中原理是什么.是怎么样子得到cDNA的. PCR和RT-PCR体系只有聚合酶的区别吗,缓冲液中第一链缓冲液是什么成分,做什么的. 关于RT-PCR的问题RT-PCR 第一步是一个反转录(reverse transcription),请问这一步之后所形成的cDNA是单链还是双链的呢? 电泳检测cDNA第一链为什么有两条带? 做RNA反转录,合成cDNA第一链时,不加DTT可以吗? RT-PCR模板选择问题.我是准备设计简并引物扩增一个鱼类的未知基因的保守区.一些文献上是提取脑部总RNA,然后反转录得到第一链CDNA,然后用这CDNA做模板扩增保守区.但是我老师的想法是直接提 反转录PCR引物如何设计?已经得到cDNA第一链,引物设计是以cdna为模版,设计上下游引物吗?cDNA不是只有一条链吗,是不是只需要一条引物?求详解. 用普通RT试剂盒(富酶泰斯的)逆转录出的cDNA,可作为实时荧光定量PCR反映中的DNA模板用嘛? kb cDNA CTK PCR