我的目的片段有500bp,可我 不知道它究竟有什么酶切位点,我怎么样才可以知道?我的目的片段是cDNA,

我的目的片段有500bp,可我 不知道它究竟有什么酶切位点,我怎么样才可以知道?我的目的片段是cDNA, 我要扩增1200bp的目的片段,但跑胶后结果总是比我的目的带大300多bp,我以为是引物的问题,换过引物也那样请问哪位大侠知道原因啊? 胶回收：雀式pcr第一对pcr引物扩增后 ,产物电泳得到两条带,那么我该切哪一条啊?怎么知道目的片段的bp?不是目的片段的bp，图片中左边第一条是marker，第五第六条各有两条带，在1000 和1400的 PCR 我P的是两个基因 前两个样品的目的片段是612bp 后两个是672bp 请问P出来了吗? 大片段的RT-PCR现在在做RT-PCR,目的片段5500多bp,用什么样的反应体系和条件能P出来啊?..希望知道或做过这方面实验的帮帮忙,如果p出来,下一步用什么载体连接最好,实验室里有T3、pMD19-Tps：我的 PCR不能扩增出目的条带,用的是文献中提供的引物总是扩增不出来,目的片段279bp,我用的条件是94℃,5min；94℃,30s,50℃,30s,72℃,45s,30个循环；72℃,5min.其中退火温度有试过56℃,58℃,都不行,只有引 我在做overlap PCR,两个片段一条736bp,一条255bp,20个重叠碱基,四个引物的TM值都是59度,两条都P出来了现在加入两端的引物,就是扩不出来1000的条带,这20重叠有13个是CG对,我不知道是不是退火温度的 引物发夹结构我用的是文章里面的引物,与NCBI里面的序列比对,符合度100%,279bp大小,但是就是扩增不出来目的片段,只有引物二聚体,现在我想比对下,看看我用的引物是不是有严重的发夹结构,请 对PCR产物进行电泳分析有什么作用,目的片段大小多少多少bp是用来干什么的,知道的来说下, 融合蛋白 His标签问题我的目的基因片段在pET28a载体中是这样的一个情况 -----CATCATCATCATCATCAC（His-tag）-------14bp-------ATG(后面是我的目的基因片段)-------这样的话表达的蛋白会有His-tag吗? 用TaKaRa的pMD18-T Vector可以16°C连接过夜吗(我的目的片段在600~700bp之间)? 二极管上标了CCD BP我搜索是瞬变抑制二极管 ,不知道有什么二极管可以替换它.具体替换的二极管型号这是三基变频器上的瞬变抑制二极管,具体参数不知道是什么. pUC19连接了大于3kb的片段,提取质粒时质粒变小了,丢了600bp,这样我就测不到目的基因序列,怎么办? pcr时p不出目的基因 怎么办 急我扩耐药基因 扩出来过一次 5株菌都是800bp目标条带 可以后就再也没有扩出来 有两个菌竟然扩出1300bp的带 为何 引物没有问题哈 小片段DNA的PCR扩增程序我要扩的DNA片段138KB扩了很多次都没有扩出来,想问问大家,谁扩过这么小的片段,PCR程序是怎么设定的本人要扩增的是138bp的小DNA,怎么也扩不出来,不知道该怎么办.我的上 质粒酶切后,目的片段DNA是小片段,琼脂糖电泳图目的条带太暗,怎么增加亮度?我的目的条带在200bp左右,酶切跑胶,能看见目的条带,但是太暗了,怎么能够增加亮度啊?补充：我用的琼脂糖凝胶浓 PCR长的目的片段需要注意什么我设计的引物溶解温度是56.3和60.9度,相差有些大.我的目的片段大概3.7Kbp.我用的天根的Taq酶用通用的时间退火温度56度P出来几百bp的片段,然后又延长退火时间到4 质粒双酶切后,目的片段DNA是小片段,才56bp,我做的琼脂糖电泳图目的条带看不到,这么小能不能看到呢?如果因片段太小电泳看不到,那么怎么判断小片段被切下来了呢?